學生記得「用限制酶切」,但整個流程講到第三步就散。這一堂把流程固定成四個動作:切、接、送、選,每一步都問「用什麼工具、為什麼要用它」。
本堂目標 學生能夠:① 順序講出基因工程的四個步驟並指出每步所用的工具;② 解釋 PCR 三個溫度階段的用途並算出放大倍數;③ 就基因改造食物提出正反論點並用證據支持。
01 先備知識(開課前 3 分鐘快檢)
以下任何一項未過關,本堂就會卡住,先補該項:
| 技能 |
快檢題 |
過關標準 |
| DNA 結構 |
互補鹼基配對是哪兩對 |
A–T、C–G |
| 酶 |
酶的作用是什麼 |
降低活化能,加快反應 |
| 細胞 |
質體位於哪類細胞 |
細菌 |
02 課堂流程(60 分鐘)
| 時間 |
環節 |
導師做什麼 |
學生做什麼 |
| 0–10 分 |
診斷 |
排序四張流程卡 |
講出每步工具 |
| 10–24 分 |
切與接 |
限制酶與連接酶 |
講出黏性末端 |
| 24–36 分 |
送與選 |
轉化與篩選 |
講出標記基因 |
| 36–48 分 |
PCR |
95/55/72 °C 三階段 |
算出放大倍數 |
| 48–56 分 |
議題題 |
基因改造食物正反 |
每邊兩個論點 |
| 56–60 分 |
離場檢查 |
三題收回即批 |
獨立完成 |
03 講解腳本(照著說就可以)
第一幕:切與接:工具與末端要對得上
限制酶在特定序列切開 DNA,產生黏性末端;同一種酶切出來的末端才能互相配對,所以載體與目的基因要用同一種酶。
DNA 連接酶負責把糖—磷酸骨架接回,形成重組 DNA。
要學生答:如果兩種酶切出平末端,會有什麼後果(配對效率低,可能反向插入)。
導師做法:用剪刀與膠紙比喻,剪口要對得住才貼得實。
第二幕:送與選:沒有篩選等於白做
重組質體放入細菌叫轉化;但大部分細菌沒有成功吸收,所以要用標記基因(例如抗生素抗性)篩選。
只有能在含抗生素培養基生長的,才可能帶有質體;再用另一種方法確認插入方向與序列。
易錯:把「轉化」講成「感染」,或以為所有細菌都會成功。
導師做法:要學生講「如果冇篩選,我會拿到咩」(一堆普通細菌)。
第三幕:PCR:三個溫度,一個目的
95 °C 變性,分開雙鏈;55 °C 退火,引子結合;72 °C 延伸,聚合酶複製。30 個循環後放大 2^30 = 1,073,741,824 倍。
PCR 只是放大,不會改變序列,也不能取代基因工程的其他步驟。
提醒:問「為什麼要高溫」要答「破壞氫鍵分開兩鏈」,不是「殺死細胞」。
導師做法:要學生把三個溫度寫成時間軸,講一次完整循環。
04 必教題型與步驟
| 題型 |
例子 |
步驟 |
答案 |
| 排序 |
把基因工程步驟排好 |
切—接—送—選 |
每步寫工具 |
| 解釋 |
解釋某一步為何需要 |
工具+作用+後果 |
要講「如果唔做會點」 |
| 計算 |
PCR 放大倍數或 DNA 長度 |
2^循環數 |
寫明循環數 |
| 議題 |
基因改造食物的利弊 |
正反各兩點+證據 |
不可只寫立場 |
合理性檢查(一定要教):每個步驟都要能答「用什麼、為什麼、不做會怎樣」。PCR 循環數與倍數是一對一關係,循環數每加一,倍數乘二。議題題若只有立場沒有證據,最多給一半分。
05 獨立練習三題
| 題目 |
答案 |
想觀察什麼 |
| 30 個 PCR 循環後放大幾倍 |
1,073,741,824 倍 |
2^循環數 |
| 為何目的基因與載體要用同一種限制酶 |
產生相同黏性末端才能接合 |
末端要互補 |
| 篩選步驟為何必要 |
大部分細菌未成功吸收質體 |
要靠標記基因分辨 |
06 學生常見錯誤與糾正句
| 錯誤 |
學生通常這樣寫 |
導師這樣說 |
| 漏篩選 |
流程只講到插入 |
「你點知邊隻細菌成功?要篩選。」 |
| 工具混淆 |
用連接酶「切」DNA |
「切係剪刀,接係膠水,唔可以調轉。」 |
| PCR 當成改造 |
以為 PCR 會改變基因 |
「PCR 只係影印,唔會改內容。」 |
| 議題只得立場 |
只寫「基因食物有害」 |
「證據呢?講一樣具體風險。」 |
07 家課建議(直接指到練習卷題號)
08 離場檢查(最後 5 分鐘)
| 題目 |
答案 |
判定 |
| 30 循環放大倍數 |
1,073,741,824 |
錯=重講 2^n |
| 重組 DNA 用哪種酶接合 |
DNA 連接酶 |
錯=重講工具 |
| 為何要篩選 |
大部分細菌未吸收質體 |
錯=下堂補標記基因 |
09 導師常問
限制酶會切自己人的 DNA 嗎
會,所以實驗用特定序列,並在體外操作。
PCR 為何需要引子
提供游離 3′ 端,讓聚合酶開始合成。
基因改造一定有害嗎
要按個案看證據,風險與效益都要講。
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