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DSE 生物|生物工程 備課指引(導師用)|PCR、電泳與基因轉移

DSE 生物|生物工程 備課指引(導師用)|PCR、電泳與基因轉移

  • 2026-11-01

學生把 PCR 當成「複製 DNA」,但講不出三十個循環之後有幾多份。這一堂要用指數把抽象變數字:每循環加倍,三十循環就是十億倍。

本堂目標 學生能夠:① 用 2ⁿ 算 PCR 放大倍數;② 由凝膠電泳的條帶位置判斷片段大小;③ 講出限制酶、載體、接合酶三步的次序與目的,並算轉化效率。

01 先備知識(開課前 3 分鐘快檢)

以下任何一項未過關,本堂就會卡住,先補該項:

技能 快檢題 過關標準
指數 2 的 10 次方 1024
鹼基配對 A 配什麼 T
酶 酶的作用是什麼 降低活化能、專一

02 課堂流程(60 分鐘)

時間 環節 導師做什麼 學生做什麼
0–8 分 溫故:DNA 結構 A-T、G-C 寫出配對
8–20 分 PCR 三溫 變性、退火、延伸 講出溫度次序
20–32 分 指數放大 30 個循環 1.07e+09 倍
32–44 分 凝膠電泳 細片段行得快 比較三條帶
44–54 分 限制酶與載體 切、接、入 效率 2000 群落/µg
54–60 分 離場檢查 三題收回即批 獨立完成

03 講解腳本(照著說就可以)

第一幕:PCR 就是每次加倍,三十次之後已經失控地多

一個循環變兩份,30 個循環就是 2^30 = 1.074e+09,即約十億倍。導師要學生先算 2 的 10 次方(1024),再三乘十次,比死記答案清楚。

板書重點:PCR 就是每次加倍,三十次之後已經失控地多

第二幕:電泳只看一件事:大小

凝膠是篩,DNA 帶負電向正極走;片段越細,穿過孔越快,走得越遠。2000 bp 留在上面,500 bp 走到下面,同一條 lane 兩條帶就是兩個不同大小的產物。

板書重點:電泳只看一件事:大小

第三幕:基因轉移三步不能亂序

限制酶切開載體與目標基因(留下 sticky end)→ 接合酶封口 → 送入細菌。若 0.1 µg DNA 長出 200 個群落,轉化效率就是 2000 群落/µg。鹼基組成也要一致:A 佔 30%,T 亦是 30%,剩 40% 由 G 與 C 平分,各 20%。

板書重點:基因轉移三步不能亂序

04 必教題型與步驟

題型 例子 步驟 答案
計算 PCR 放大倍數 2ⁿ 1.07e+09
判斷 電泳條帶 越細走得越遠 500 bp 在最下
計算 鹼基比例 A=T、G=C G 20%
計算 轉化效率 群落 ÷ µg 2000/µg
合理性檢查(一定要教):2 的次方要用計算機或對數,不可估。bp 是長度單位不是重量,電泳分的是長度不是質量。轉化效率的分母是加入的 DNA 質量(µg),不是培養基體積。

05 獨立練習三題

題目 答案 想觀察什麼
30 個循環的放大倍數 1.07e+09 2^30
A 佔 30%,G 佔幾多 20% (100−60)÷2
0.1 µg DNA 得 200 群落,效率 2000/µg 200÷0.1
2000 bp 與 500 bp 哪條走得遠 500 bp 細片段快

06 學生常見錯誤與糾正句

錯誤 學生通常這樣寫 導師這樣說
PCR 算成線性增長 30 循環 = 30 倍 「每個循環係乘二,唔係加一,所以係十億倍。」
以為大片段走得遠 指 2000 bp 在最下 「凝膠係篩,越大越卡住,大片段留在上面。」
次序倒轉 先接合再切 「要先切出 sticky end 才接得上,倒轉就接唔埋。」
轉化效率用體積做分母 除以 1 cm³ 「分母係 DNA 質量 µg,唔係液體體積。」

07 家課建議(直接指到練習卷題號)

08 離場檢查(最後 5 分鐘)

題目 答案 判定
2^30 1.07e+09 錯=重練指數
電泳哪條帶最遠 最細的片段 錯=重講篩
0.1 µg 得 200 群落的效率 2000/µg 錯=重講分母

09 導師常問

PCR 為何要三個溫度?

變性斷氫鍵、退火讓引子貼上、延伸讓聚合酶複製,溫度次序不能亂。

為何要用限制酶而不是隨機剪?

限制酶只在特定序列切,切口一致才接得返同一個位。

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本頁為 TutorZone 導師備課指引,內容由 TutorZone 團隊編寫;題目與流程為原創,並非任何學校或出版社的教材。

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